Алессандра Муссолини родилась в Риме. Дочь Анны-Марии Шиколоне (из Поццуоли, Неаполь) и Романо Муссолини, четвёртого сына фашистского диктатора Бенито Муссолини (из Форли, Эмилия-Романья). Актриса София Лорен — её тетя.
С 1976 по 1980 год училась в Американской заграничной школе в Риме. В 1986 году закончила Университет Римини, получив звание магистра киноменеджмента.
28 октября 1989 года Алессандра вышла замуж за офицера таможенной полиции Мауро Флориани. У них трое детей: Катерина, Кларисса и Романо, названный в честь деда. Она около года боролась за то, чтобы троим её детям разрешили носить фамилию Муссолини. Она неоднократно заявляла, что гордится своим знаменитым родственником, но в данном случае отстаивала не столько честь деда, сколько свои права как женщины. Алессандре удалось добиться своего, однако процесс оказался долгим, утомительным и довольно дорогим.
В молодости при поддержке тёти пыталась стать актрисой, снялась в эпизодической роли в картине «Особенный день», удостоенной в 1977 году «Оскара» за лучший иностранный фильм. Работала фотомоделью, сотрудничала с журналом Playboy и появлялась на обложки выпусков итальянского (август 1983) и немецкого (ноябрь 1983) выпуска. В 1982 году Муссолини выпустила альбом поп-музыки романтичных песен под названием Amore на Alfa Records, альбом был выпущен только в Японии и с тех пор стал коллекционной редкостью.
В 1992 году переключила своё внимание на политику, победив на выборах в парламент от партии «Национальный альянс». В 2003 году основала собственную партию «Социальная инициатива», которая не просуществовала и трёх лет. В настоящее время примыкает к альянсу правых партий Сильвио Берлускони.
В ноябре 2007 года много шума наделало заявление Муссолини о том, что все румыны — преступники. Оно привело к распаду в Европарламенте националистической коалиции «Идентичность, традиция, суверенитет», членом которой являлась Муссолини.