Лено родился в Нью-Йорке, закончил колледж в начале 1970-х, а его телевизионная карьера пошла успешно уже в 90-е. На его манеру оказали влияние Дон Рикельс, Джонни Карсон, Боб Ньюхарт. Лено озвучивал небольшие роли во многих популярных мультсериалах — в частности, кошку Китти и самого себя в «Южном парке», роли в эпизоде «Симпсонов» «The Last Temptation of Krust» и «Гриффинов» — «Patriot Games». Несмотря на значительный успех, манера ведения и имидж Джея Лено нередко подвергаются критике (в частности, полушутливой критике со стороны другого знаменитого телевизионного комика — Дэвида Леттермана).
Джей Лено часто шутит над самим собой, не забывая упоминать свой большой подбородок, ставший своего рода визитной карточкой комика.
Увлекается коллекционированием автомобилей и мотоциклов. Его частная коллекция включает в себя около 130 автомобилей и около 100 мотоциклов.