Джейн Дарвелл, урождённая Пэтти Вудард, родилась 15 октября 1879 года в Палмире, Миссури. В юности она мечтала стать цирковым исполнителем, но этому воспротивился её отец, но всё же страсть к выступлениям не утихала и она решила заняться актёрской карьерой.
Играть на сцене она начала в театрах Чикаго, а её дебют в кино состоялся в 1913 году. В последующие два года актриса полностью посвятила себя кино, снявшись более чем в двадцати фильмах, но после этого вновь вернулась в театр. Спустя 15 лет театральной карьеры Джейн Дарвелл снова появилась в Голливуде в фильме «Том Сойер», начав тем самым второй этап своей кинокарьеры. В кино ей обычно доставались роли домохозяек, матерей главных героев, пожилых тётушек и бабушек.
В 1940 году Джейн Дарвелл стала обладательницей премии «Оскар» как «лучшая актриса второго плана» за роль мамы Джоад в фильме «Гроздья гнева». В общей сложность за всю свою карьеру актриса снялась более чем в 180 фильмах, среди которых «Унесённые ветром» (1939), «Дьявол и Дэниэл Уэбстер» (1941), «Моя дорогая Клементина» (1946), «Фургонщик» (1950), «В клетке» (1950) и многих других. Её последней ролью стала старая женщина, кормящая птиц в диснеевском фильме «Мэри Поппинс» (1964).
За свой вклад в киноиндустрию США Джейн Дарвелл удостоена звезды на Голливудской аллее славы.
Джейн Дарвелл умерла от инфаркта 13 августа 1967 года в пригороде Лос-Анджелеса в возрасте 87 лет, и была похоронена на мемориальном кладбище в Глендейле, Калифорния.