Дочь актёра Расса Тамблина и крестница актёра Дина Стоквелла Эмбер Тэмблин родилась 14 мая 1983 года в городе Санта-Моника, Калифорния. После успешного выступления в спектакле «Пеппи Длинный Чулок» Эмбер была замечена агентами. На заре своей карьеры она снялась в фильмах «Мальчишник наоборот» и «Волшебное кольцо», а также сериале «Главный госпиталь». Занимается вокалом, рисует и пишет стихи.
Наиболее известными ролями являются роль Джоан в сериале «Новая Жанна Д’Арк» и роль Тибби в фильмах «Джинсы-талисман» и «Джинсы-талисман 2». Эмбер Тэмблин получила роль врача Марты Мастерс в команде доктора Хауса в 7-м сезоне сериала «Доктор Хаус».