Руслана родилась 24 мая 1973 года во Львове в семье Нины Аркадьевны Лыжичко (дев. Сапегина) (род. 7 января 1950), родом из России, мать с 1975 работала в Институте нефтехимии во Львове, а с 1996 года работает в продюсерском агентстве Русланы "Студии «Люксен» главным медиа-менеджером, родители развелись в 1981 году) и Степана Ивановича Лыжичко родом из села Конюшки Рогатинского района в Ивано-Франковской области, отец работал теплотехником в Институте нефтехимии, потом основал свою фирму. У Русланы есть сестра по имени Анна. По инициативе её матери стала учиться музыке, посещала музыкальную школу, пела в разных группах, включая группы «Горизонт», «Орион» и детский ансамбль «Улыбка». Окончила 52-ю школу во Львове. В 1995 году окончила Львовскую консерваторию как дирижёр и пианист.
Начала карьеру как победительница фестиваля «Славянский базар» в 1996 году. В этом же году была номинирована как Певица года на Украине, вместе с клипом на песню «Дзвінкий Вітер» была номинирована как «Лучшее Видео». В это время ее продюсером и автором песен становится Александр Ксенофонтов, за которого певица вышла замуж в 1995 году.
В 1997 году начала работать над проектом «Рождество с Русланой» — первой Рождественской теле-программой из Львова.
В 1998 году вышел дебютный альбом «Дзвінкий Вітер», который получил хорошие оценки критиков. Песня «Світанок» получила приз «Золотая Жар-птица 98» в номинации «Лучшая песня года».
Её отец уроженец Западной Украины, его предки были гуцулы. Руслана решила использовать гуцульские мотивы в своих аранжировках, звуки трембиты и других народных инструментов вместе с современным танцевальным звучанием.
В 2004 году Руслана приняла участие вместе с композицией «Wild Dances» в конкурсе песни «Евровидение», который проходил в Стамбуле. На песню был снят видеоклип, показанный по MTV Россия и признанный передачей «12 злобных зрителей» худшим клипом недели. Руслана заняла 2-е место в полуфинале конкурса Евровидение-2004, а 16 мая 2004 в финале заняла первое место с результатом в 280 очков. Все страны удостоили Руслану очками, за исключением Швейцарии.
Как победитель предыдущего Евровидения, Руслана открывала конкурс в 2005 году вместе с песней «Heart on Fire», а также на правах приглашенного гостя исполнила песню «The Same Star».
Также в 2006 году песня «Wild Dances» была признана немецким телевидением как «Лучшая песня Евровидения».
В 2008 году Руслана открывала национальный отбор на Евровидение в Азербайджане, который впервые участвовал в конкурсе.
В 2008 году певица выпустила альбом «Амазонка».
Также была замечена в политической деятельности: Руслана принимала участие в предвыборной кампании Виктора Ющенко, а в 2006 году певица была избрана в Верховную Раду Украины от партии «Наша Украина», но впоследствии отказалась от мандата. Помимо этого, певица являлась доверенным лицом кандидата в президенты Украины Юлии Тимошенко в Львовской области.
В мае 2011 года приняла участие в музыкальном шоу-проекте «Голос Страны» («Голос Країни»), украинского канала «1+1», в качестве звёздного тренера. Проект стартовал 22 мая, Руслана вместе с Дианой Арбениной, Стасом Пьеха и Александром Пономаревым, отбирают, каждый в свою команду, по 14 участников из числа вокалистов-профессионалов. «Фишкой» этого проекта стал сам отбор участников — вслепую, ориентируясь только на слух, так как тренеры сидят в специальных креслах спиной к сцене.
29 апреля 2008 года вышла игра Grand Theft Auto IV (для Xbox 360 и PlayStation 3, ПК-версия вышла 3 декабря), в которой Руслана является ди-джеем на одной из радиостанции — (Vladivostok FM). Также в игре представлена украинская версия песни «Дикие Танцы».