Толкачёв родился в деревне Скирмонтово (Дзержинский район, Минская область). В 1957 он окончил БГУ и приступил к работе в Институте физики АН БССР, в 1984 возглавил Лабораторию спектроскопии свободных молекул (в 1992—2008 — в составе Института молекулярной и атомной физики НАН Беларуси). Одновременно в 1992-96 занимал должность заместителя директора Научно-технического центра Гознака Республики Беларусь, а с 2002 — заместителя академика-секретаря Отделения физики, математики и информатики НАН Беларуси.
Научные работы Толкачёва посвящены люминесценции, квантовой электронике, спектроскопии молекул. Он изучил механизмы формирования спектров люминесценции молекулярных паров, ввел для них новые физические характеристики, измерение которых позволило раскрыть природу антистоксовой люминесценции молекул, развил новые методы определения ряда параметров этого свечения.
Толкачёв совместно с Н. А. Борисевичем сформулировал критерии получения лазерной генерации на сложных молекулах, показал перспективность использования в лазерах десятков органических красителей, что позволило создать первый лазер на пара?х сложных молекул, перестраиваемый по частоте лазер на пара?х с распределенной обратной связью и с самоциркуляцией активной среды, а также обнаружил эффект оптически наведенной анизотропии в парах красителей. В 1980 эта деятельность по созданию и развитию спектроскопии свободных сложных молекул была отмечена Ленинской премией.
В дальнейшем Толкачёв исследовал вращательную анизотропию паров сложных молекул, поляризационные характеристики спектров люминесценции и их связь со строением молекул, установил закономерности деполяризации свечения при столкновениях молекул, установил закономерности анизотропии паров, вызванной возбуждением электронным пучком, а также при их охлаждении в сверхзвуковой струе. В 1998 за работы по поляризационной спектроскопии сложных молекул В. А. Толкачёв, Н. А. Борисевич, А. П. Блохин и В. А. Поведайло были удостоены Государственной премии Республики Беларусь. После этого им было показано, что молекулярное вращательное квантовое эхо имеет первоосновой периодическое выстраивание фундаментальных осей молекул и, соответственно, молекулярных характеристик, анизотропных в этих осях. Предложен и развит флуоресцентно-поляризационный метод определения столкновительного тушения электронно-возбужденных состояний свободных сложных молекул.
Толкачёв является автором 13 изобретений и более 130 научных работ, среди которых: